একটি অতিস্বনক সেল পেষণকারী ব্যবহার করে সেল ফ্র্যাগমেন্টেশনের মাধ্যমে ক্লোরোফিল নিষ্কাশনের জন্য নির্দিষ্ট পদক্ষেপ

অতিস্বনক সেল পেষণকারী গহ্বর তৈরি করতে তরল মধ্যে আল্ট্রাসাউন্ডের বিচ্ছুরণ প্রভাবকে ব্যবহার করে, যার ফলে তরলে কঠিন কণা বা কোষের টিস্যু ভেঙে যায়।
জৈবিক শিল্পের বিকাশ অতিস্বনক সেল পালভারাইজার ব্যবহার করে পরীক্ষা-নিরীক্ষার প্রয়োজনীয়তা বাড়িয়েছে, যেমন নমুনা তাপমাত্রা পরিমাপ এবং নিয়ন্ত্রণ করা, নিম্ন-তাপমাত্রার শীতল নমুনার বুদ্ধিমত্তা স্তর উন্নত করা এবং পুরো মেশিন ইত্যাদি।
একটি অতিস্বনক সেল পেষণকারী ব্যবহার করে অতিস্বনক সেল ক্রাশিংয়ের মাধ্যমে ক্লোরোফিল নিষ্কাশনের জন্য নির্দিষ্ট পদক্ষেপ:
1. জলের নমুনা সেন্ট্রিফিউজ বা ফিল্টার করুন এবং সাকশন ফিল্টারে একটি অ্যাসিটেট ফাইবার ফিল্টার মেমব্রেন ইনস্টল করুন। পরিস্রাবণের জন্য জলের নমুনার পরিমাণগত পরিমাণ ঢালা, এবং পরিস্রাবণের সময় নেতিবাচক চাপ খুব বেশি হওয়া উচিত নয় (প্রায় 50kPa)। জলের নমুনা আঁকার পরে, ফিল্টার ঝিল্লিতে আর্দ্রতা কমাতে 1-2 মিনিটের জন্য আঁকতে থাকুন। যদি স্বল্পমেয়াদী সঞ্চয়স্থানের প্রয়োজন হয় 1-2 দিনের জন্য, তবে এটি হিমায়িত করার জন্য একটি নিয়মিত রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণ করা যেতে পারে। যদি দীর্ঘমেয়াদী সঞ্চয়ের প্রয়োজন হয় (30 দিন), এটি একটি কম-তাপমাত্রার রেফ্রিজারেটরে (-20 ডিগ্রি) সংরক্ষণ করা উচিত।
2. ফাইটোপ্ল্যাঙ্কটন ধারণকারী ফিল্টার মেমব্রেনটি বের করে নিন এবং কম তাপমাত্রায় 6-8 ঘণ্টার জন্য ফ্রিজে শুকিয়ে নিন। কাঁচি দিয়ে এটিকে ছোট ছোট টুকরো করে কেটে একটি 5 মিলি বা 10 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে রাখুন। তরল স্তরের নীচের অংশগুলিকে ডুবিয়ে দিতে 90% অ্যাসিটোনের 3-4 মিলি যোগ করুন। একটি অতিস্বনক পাত্রে টুকরা রাখুন এবং নমুনার কোষগুলি ভাঙতে অতিস্বনক তরঙ্গ ব্যবহার করুন। (একীভূত পদ্ধতির জন্য * ফ্র্যাগমেন্টেশন সময় এবং ফ্রিকোয়েন্সি সনাক্তকরণের সুবিধার্থে বিভিন্ন সময়ে এবং ফ্রিকোয়েন্সিগুলিতে পরীক্ষাগুলির তুলনা করা)।
3. 10 মিনিটের জন্য একটি সেন্ট্রিফিউজ (3000-4000r/min) ব্যবহার করে আল্ট্রাসাউন্ড ব্যবহার করে সেল ফ্র্যাগমেন্টেশনের শিকার নমুনাকে সেন্ট্রিফিউজ করুন। একটি 5 মিলি বা 10 মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে সুপারনাট্যান্ট ঢালা। 90% অ্যাসিটোন দিয়ে 5 মিলি বা 10 মিলি পাতলা করুন এবং ভালভাবে ঝাঁকান।
4. একটি স্পেকট্রোফোটোমিটারে সুপারনাট্যান্ট রাখুন এবং যথাক্রমে 750nm, 663nm, 645nm এবং 630nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে শোষণের মানগুলি পড়তে 1cm অপটিক্যাল পাথ কালারমিট্রিক ডিশ ব্যবহার করুন। নমুনার শোষণ সংশোধন করতে একটি ফাঁকা শোষণ পরিমাপ হিসাবে 90% অ্যাসিটোন ব্যবহার করুন।